Analysis of the enzymatic reactions in the conversion of fructose - 6 - phosphate to glycerin

Abstract

Fructose-6-phosphate aldolase cleavages fructose-6-phophate to glyceraldehyde-3-phosphate and dihydroxyacetone. To produce glycerin from dihydroxyacetone, glycerol dehydrogenase was used. The synthesis of glycerin was started from the very beginning with cell transformation, through heat shock, of Escherichia coli strain adding the plasmid with the gene which codifies the proteins which are needed to carry out the synthesis. Then the production of those proteins and the respective assays with different buffers which are used in the synthesis were carried out and then with assays of the both enzymes to see if they can work together, trying to have the best conditions for both of them. Finally the synthesis to produce glycerin with the chosen conditions was designed and was run.

La fructosa-6-fosfat aldolasa divideix la fructosa-6-fosfat en d-gliceraldehid-3-fosfat i dihidroxiacetona. Per produir la glicerina de la dihidroxiacetona, es va utilitzar glicerol deshidrogenasa. La síntesi de la glicerina es va iniciar des del principi amb una transformació cel·lular, a través d'un xoc de calor, d'una soca d'Escherichia coli afegint el plasmidi amb el gen que codifica les proteïnes que són necessàries per dur a terme la síntesi. A continuació, es van dur a terme la producció d'aquestes proteïnes i els respectius assajos amb diferents tampons que s'utilitzen en la síntesi i després, els assajos dels enzims, per veure si poden treballar junts, tractant de tenir les millors condicions per als dos. Finalment la síntesi per produir glicerina amb les condicions triades va ser dissenyada i executada.

La fructosa-6-fosfato aldolasa divide la fructosa-6-fosfato en d-gliceraldehído-3-fosfato y dihidroxiacetona. Para producir la glicerina de la dihidroxiacetona, se utilizó glicerol deshidrogenasa. La síntesis de la glicerina se inició desde el principio con una transformación celular, a través de un choque de calor, de una cepa de Escherichia coli añadiendo el plásmido con el gen que codifica las proteínas que son necesarias para llevar a cabo la síntesis. A continuación, se llevaron a cabo la producción de estas proteínas y los respectivos ensayos con diferentes tampones que se utilizan en la síntesis y después, los ensayos de las enzimas, para ver si pueden trabajar juntos, tratando de tener las mejores condiciones para los dos. Finalmente la síntesis para producir glicerina con las condiciones elegidas fue diseñada y ejecutada.