Verificación de los métodos moleculares para la detección de Salmonella spp. y Listeria monocytogenes mediante PCR en matrices alimentarias
Visualitza/Obre
Estadístiques de LA Referencia / Recolecta
Inclou dades d'ús des de 2022
Cita com:
hdl:2117/364077
Correu electrònic de l'autorsara.carrilloestudiantat.upc.edu
Realitzat a/ambBioser
Tipus de documentTreball Final de Grau
Data2022-02-08
Condicions d'accésAccés obert
Tots els drets reservats. Aquesta obra està protegida pels drets de propietat intel·lectual i
industrial corresponents. Sense perjudici de les exempcions legals existents, queda prohibida la seva
reproducció, distribució, comunicació pública o transformació sense l'autorització del titular dels drets
Abstract
The polymerase chain reaction (PCR) is a molecular method born in 1983 with several uses in different fields of study, such as archaeology, medicine, and food safety among others. That is why the work is focused on the use of this molecular method to make a comparison between kits for the detection of pathogenic microorganisms such as Salmonella and Listeria monocytogenes in different food matrices. This will be possible thanks to a previous inoculation at different concentrations. We even wanted to go further by simulating a verification of the validation of the kits used in the study based on the ISO 16140:3 standard. In order to do this, four foods from four different categories (a dairy product, an egg product, a vegetable and a fish) and three different detection kits were chosen. These three kits will be compared with each other and the PCR results obtained will be analysed and commented. To perform the simulation of the verification, the detection limit will be calculated considering the PCR results obtained knowing that all the test samples have been inoculated with the analysed microorganisms. The results obtained have not been entirely conclusive due to small limitations that have been observed throughout the development of the experimental work, such as, for example, cross-contamination. Despite this, an analysis of the PCR results obtained has been carried out and the results obtained have been accepted as valid. This has allowed us to correctly calculate and comment on the detection limits obtained. Among the most relevant conclusions we can highlight that the work should be repeated in order to obtain conclusive and significant results that would give rise to develop a statistical study through them and to be able to discern which of the three kits is the optimal one to perform the verification many factors must be taken into account, so there is no single valid answer. Furthermore, the detection limits obtained are considerably low considering that most of them have detected the lowest inoculation performed in the different matrices. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es un método molecular nacido en 1983 con varios usos en diferentes campos de estudio, como son la arqueología, la medicina y la seguridad alimentaria entre otros. Es por eso por lo que el trabajo se centra en la utilización de este método molecular para poder realizar una comparación entre los kits destinados a la detección de microorganismos patógenos como pueden ser la Salmonella y la Listeria monocytogenes en diferentes matrices alimentarias. Esto será posible gracias a una inoculación previa a diferentes concentraciones. Incluso se ha querido ir más allá queriendo realizar una simulación de una verificación de la validación de los kits usados en el estudio basada en la normativa ISO 16140:3. Para poder llevar a cabo esto se ha elegido cuatro alimentos de cuatro categorías diferentes (un lácteo, un ovoproducto, un vegetal y un pescado) y tres kits de detección diferentes. Estos tres kits se compararán entre ellos y los resultados obtenidos de la PCR serán analizados y comentado. Para poder realizar la simulación de la verificación se calculará el límite de detección teniendo en cuenta los resultados obtenidos de la PCR sabiendo que todas las muestras del ensayo han sido inoculadas con los microorganismos analizados. Los resultados obtenidos no han sido del todo concluyentes debido a pequeñas limitaciones que se han ido observando a lo largo del desarrollo del trabajo experimental, como, por ejemplo, la contaminación cruzada. A pesar de esto, se ha realizado un análisis de los resultados obtenidos de la PCR y se ha optado por aceptar los resultados obtenidos como válidos. Esto ha permitido calcular y comentar correctamente los límites de detección obtenidos. Entre las conclusiones más relevantes se puede destacar que el trabajo debería ser repetido para poder obtener resultados concluyentes y significativos que dieran pie a desarrollar un estudio estadístico a través de ellos y para poder discernir cuál de los tres kits es el óptimo para realizar la verificación se deben tener en cuenta muchos factores, por lo que no hay una única respuesta válida. Además, los límites de detección obtenidos son considerablemente bajos teniendo en cuenta que gran parte de ellos han detectado la inoculación más baja realizada en las diferentes matrices. La reacció en cadena de la polimerasa (PCR) és un mètode molecular nascut al 1983 amb diversos usos en diferents camps d’estudi, com són la arqueologia, la medicina i la seguretat alimentaria entre altres. És per aquest motiu que l’estudi es centra en la utilització d’aquest mètode molecular per poder realitzar una comparació entre els kits destinats a la detecció de microorganismes patògens com poden ser la Salmonella i la Listeria monocytogenes en diferents matrius alimentaries. Això serà possible gracies a una inoculació prèvia a diferents concentracions. Fins i tot s’ha volgut anar més enllà realitzant una simulació d’una verificació de la validació dels kits utilitzats en l’estudi basada en la normativa ISO 16140:3. Per poder dur això a terme s’han escollit quatre aliments de quatre categories diferents (un lacti, un ovoproducte, un vegetal i un peix) i tres kits de detecció diferents. Aquests tres kits es compararan entre ells i els resultats obtinguts de la PCR seran analitzats i comentats. Per poder realitzar la simulació de la verificació es calcularà el límit de detecció tenint en compte els resultats obtinguts de la PCR sabent que totes les mostres del assaig han sigut inoculades amb els microorganismes analitzats. Els resultats obtinguts no han sigut del tot concloents degut a les petites limitacions que s’han anat observant al llarg del desenvolupament del treball experimental, com, per exemple, la contaminació creuada. Malgrat això, s’ha realitzat un anàlisi dels resultats obtinguts de la PCR i s’ha escollit acceptar els resultats obtinguts com a vàlids. Això ha permès calcular i comentat correctament els límits de detecció obtinguts. Entre les conclusions més destacables cal remarcar que el estudi de camp hauria de ser repetit per poder obtenir resultats concloents i significatius que donessin peu a poder desenvolupar un estudi estadístic a través d’aquests i per poder discernir quin dels tres kits és el més òptim per realitzar una verificació s’han de tenir en compte diversos factors, per tant, no hi ha una única resposta vàlida. A més a més, els límits de detecció obtinguts son considerablement baixos i s’ha de tenir en compte que gran part d’ells ha detectat la inoculació més baixa realitzada en les diferents matrius.
MatèriesPathogenic microorganisms, Polymerase chain reaction, Reacció en cadena de la polimerasa, Aliments -- Microbiologia
Localització
Fitxers | Descripció | Mida | Format | Visualitza |
---|---|---|---|---|
memoria.pdf | 7,755Mb | Visualitza/Obre |