Microscopic characterization of phase transition in a protein

Abstract

In this work, we have proved that SCALA technology can be successfully used to investigate thermal phase transitions in proteins at the microscopic level. For this purpose, we have functionalized silicon cantilevers, which will act as sensors during dynamical SCALA experiments, with BSA, Lys and Omp2 through epoxysilane chemistry. At room temperature, BSA is a globular protein, Lys forms a bundle of -helices, and Omp2a is organized in clusters of -barrels. SCALA measures have allowed to identify not only the unfolding of the three proteins but also the disaggregation of Omp2a -barrels. Results have been contrasted by spectroscopic CD and FTIR measures, which enabled us to corroborate the success of the SCALA experiments.

En este trabajo, hemos demostrado que la tecnología SCALA puede ser utilizado con éxito para investigar las transiciones de fase térmica en proteínas a nivel microscópico. Para este propósito, hemos funcionalizado silicon cantilevers, que actuarán como sensores durante experimentos dinámicos SCALA, con BSA, Lys y Omp2 a través de la química de epoxisilano. A temperatura ambiente, BSA es una proteína globular, Lys forma un haz de -helices, y Omp2a se organiza en racimos de-barriles. Las medidas SCALA han permitido identificar no solo el despliegue de las tres proteínas sino también la desagregación de los barriles Omp2a. Los resultados han sido contrastados por medidas espectroscópicas CD y FTIR, lo que nos permitió corroborar el éxito de los experimentos SCALA.

En aquest treball, hem demostrat que la tecnologia SCALA pot ser utilitzat amb èxit per investigar les transicions de fase tèrmica en proteïnes a nivell microscòpic. Per a aquest propòsit, hem funcionalitzat silicon cantilevers, que actuaran com a sensors durant experiments dinàmics SCALA, amb BSA, Lys i Omp2 a través de la química de epoxisilano. A temperatura ambient, BSA és una proteïna globular, Lys forma un feix de -helices, i Omp2a s'organitza en raïms de-barrils. Les mesures SCALA han permès identificar no solament el desplegament de les tres proteïnes sinó també la desagregació dels barrils Omp2a. Els resultats han estat contrastats per mesures espectroscòpiques CD i FTIR, el que ens va permetre corroborar l'èxit dels experiments SCALA.