Optimització de paràmetres de cultiu per la generació ex vivo d'eritròcits

Abstract

L‟eritropoesi és el procés de generació d‟eritròcits a partir de cèl·lules mare hematopoètiques. Ja fa temps que es va aconseguir reproduir l‟eritropoesi in vitro mitjançant els cultius eritroides. Un dels pilars bàsics de la medicina moderna és la transfusió sanguínia. Es preveu que les donacions de sang en un futur seran insuficients, per aquest motiu resulta interessant aconseguir obtenir cèl·lules vermelles mitjançant cultius in vitro per tal d‟alleugerar la falta de sang transfusional. En aquest projecte es fa la transferència del cultiu eritroide des del suport estàtic a un bioreactor, optimitzant els paràmetres de cultiu, per poder arribar a volums més elevats i a l‟automatització del sistema, augmentant d‟aquesta manera al màxim el nombre de glòbuls vermells generats a partir de cèl·lules mare hematopoètiques purificades de sang de cordó umbilical. S‟han realitzat proves amb diferents medis d‟enucleació per determinar quins components del medi afavoreixen l‟enucleació i la maduració eritroide. També s‟han realitzat cultius eritroides en condicions d‟hipòxia demostrant que aquesta condició afavoreix tant l‟expansió cel·lular com la maduració i enucleació eritroide. Finalment s‟ha detectat que els nuclis extruïts en les últimes fases de la maduració eritroide produeixen alteracions en els anàlisis citomètrics. Aquest problema es soluciona mitjançant el redisseny de les plantilles d‟anàlisi de resultats citomètrics.