Estudio de microtransportadores de hidroxiapatita (HA)/biopolímeros para regeneración ósea

Abstract

En el presente trabajo, en primer lugar, se evaluó el comportamiento de microtransportadores (MT),basados en un cemento de fosfato tricálcico alfa (alfa-TCP) y susmezclas con colágeno y gelatina, en cultivos dinámicos de osteoblastos. Para ello, a través de la técnica de emulsión de agua en aceite, se fabricaron microesferas a partir de el cemento de (alfa-TCP). Éste por medio de un proceso de hidrólisis, se convierte en hidroxiapatita (HA) y se denominaron: MT-HA (únicamente contienen HA), MTGel-HA (HA y gelatina) y (MTCol-HA) (HA y colágeno). Los MT de diámetro (100-297)micrometros fueron vultivados en dinámico y estático (control) con cálulas Saos-2, a diferentes tiempos de cultivos: 14 días (ensayos largos) y 72 horas (ensayos cortos). Se realizarón observacions de los MT cultivados emplemando un microscopio de fluorescencia para comporvar la viabilidad celular demostrando que tosos los MT planteados son capaces de sostenenr el crecimiento de células. Saos-2. Imagines de mocroscopia óptica de barrido (MEB) mostraron la formación de puentes por parte de los osteoblastos entre microesferas, así como numerosos aglomerados de MT. A tiempos largos (14 días de cultivos) los MTGel-HA mostraron una mayor concentración celular comparado con los MT-HA, mientras que en el cultivo estático no se encontraron diferencias estadísticamente significativas. A 72h de cultivo dinámico los MTCol-HA se observaban fragmentados y mostraron una concentración celular similar a los MT-HA, mientras que los MTGel-HA exhibieron un comportamiento más positivo en cuanto a adhesión celular, equivalente al de los MT empleados como control (Cytodex 3), cuya matriz está compuesta de dextrano y colágeno. En segundo lugar, se realizó un ensayo preliminar con scaffolds (andamios 3D que sirven para el crecimiento de tejido) inyectables, fabricados a partir de los MT-HA (100-279)microm y MTGel-HA(100-279)microm y (279-590)microm, en combinación con un gel de alginato de sodio. Se obtuvieron muestras cilíndricas (6mm de diámetro x 12mm de alto), las cuales fueron liofolizadas con el fin de observar la distribución de la microesferas una vez inyectadas en el molde. Se obtuvieron muestras con un porcentaje de porosidad similar para los tres tipos de MT empleados. Sin embargo la distribución de los tamaños de poro sí se vio afectada por el tamaño de los MT. Los scaffolds preparados a partir de MTGel-HA (297-590)microm, presentaron una distribución del tamño del poro más ancha. Las propiedades mecánicas en compresión de los tres tipos de scaffolds resultaros similares y pobres.