DSpace DSpace UPC
 English   Castellano   Català  

Treballs academics UPC >
Màsters Oficials >
Màster en Enginyeria Biotecnològica >

Empreu aquest identificador per citar o enllaçar aquest ítem: http://hdl.handle.net/2099.1/9199

Ítem no disponible en accés obert per decisió de l'autor/autora

Arxiu Descripció MidaFormat
memòria-annex.pdfMemòria4,57 MBAdobe PDF Accés restringit

Títol: Pèptids AT-Hook i proteïna HMGA1a(A50-91) humana. Expressió, purificació i cristal·lització amb oligonucleòtids
Autor: Rodríguez Puente, Sonia
Tutor/director/avaluador: Saperas Plana, Núria Veure Producció científica UPC; Campos López, Josefina de Lourdes Veure Producció científica UPC
Universitat: Universitat Politècnica de Catalunya
Càtedra /Departament: Universitat Politècnica de Catalunya. Departament d'Enginyeria Química
Matèries: Àrees temàtiques de la UPC::Enginyeria química::Biotecnologia
Peptides
Proteins
Cells
Bioengineering
Pèptids
Proteïna
Cèl·lules
Bioenginyeria
Data: set-2009
Tipus de document: Master thesis
Resum: La proteïna HMGA1a humana és una proteïna que es troba al nucli de les cèl·lules i que pot modificar la conformació espacial del DNA regulant l’expressió de molts gens. Se sap que la interacció es dóna a través d’uns motius d’unió al DNA denominats AT-hooks que s’uneixen preferentment a regions riques en ATs del solc estret del DNA. D’aquesta manera l’HMGA1a influeix en molts processos cel·lulars normals com són el creixement cel·lular, la diferenciació cel·lular o la reparació del DNA. D’altra banda, les proteïnes HMGA estan relacionades amb nombrosos processos patològics, entre ells el càncer. Per a comprendre com actua aquesta proteïna és molt important arribar a determinar l’estructura tridimensional dels seus complexos amb el DNA. Amb aquest objectiu s'ha intentat aconseguir complexos cristal·litzats d'aquesta proteïna o motius d'unió al DNA (pèptids AT-hook) amb oligonucleòtids. Concretament s’ha treballat amb la forma HMGA1a(A50-91) i els pèptids corresponents a les regions AT-hook I, II i III. Primerament s’ha obtingut la forma HMGA1a(A50-91) amb la tècnica del DNA recombinant mitjançant la seva expressió en un cultiu del bacteri Escherichia coli i s’ha purificat fins obtenir una fracció prou pura i concentrada pels estudis cristal·logràfics. Les tècniques emprades han estat la cromatografia de bescanvi iònic i la de gel filtració. En segon lloc, s’han realitzat tot un seguit d’assajos cristal·logràfics mitjançant la tècnica de difusió de vapor amb gota penjada: - Proteïna HMGA1a(A50-91) amb els següents oligonucleòtids: CGCAT2A2TGCG, A2TA2T2AT2 iCGCGAT2A2T. - Pèptids AT-hook amb els oligonucleòtids CGCAT2A2TGCG, A2TA2T2AT2, CGCGAT2A2T i GGGAAATTCCTC. A partir dels vuitanta assajos realitzats, es van poder congelar vint-i-tres cristalls que van ser analitzats per difracció de raigs X al sincrotró de Grenoble (ESRF). Finalment, s’han obtingut els paràmetres de la cel·la unitària i el sistema cristal·lí de dos complexos de pèptid-DNA.
URI: http://hdl.handle.net/2099.1/9199
Condicions d'accés: Restricted access - author's decision
Apareix a les col·leccions:Màster en Enginyeria Biotecnològica
Comparteix:



SFX Query

Tots els drets reservats. Aquesta obra està protegida pels drets de propietat intel·lectual i industrial corresponents. Sense perjudici de les exempcions legals existents, queda prohibida la seva reproducció, distribució, comunicació pública o transformació sense l'autorització del titular dels drets.

Per a qualsevol ús que se'n vulgui fer no previst a la llei, dirigiu-vos a: sepi.bupc@upc.edu

 

Valid XHTML 1.0! Programari DSpace Copyright © 2002-2004 MIT and Hewlett-Packard Comentaris
Universitat Politècnica de Catalunya. Servei de Biblioteques, Publicacions i Arxius