DSpace DSpace UPC
 English   Castellano   Català  

Treballs academics UPC >
Màsters Oficials >
Màster en Enginyeria Biotecnològica >

Empreu aquest identificador per citar o enllaçar aquest ítem: http://hdl.handle.net/2099.1/10725

Ítem no disponible en accés obert per decisió de l'autor/autora

Arxiu Descripció MidaFormat
TFM.pdfReport1,08 MBAdobe PDF Accés restringit

Títol: Production, purification and biochemical characterization of lactate oxidase wild type and double mutant
Autor: García Grillasca, Gustavo
Tutor/director/avaluador: Calafell Monfort, Margarita Veure Producció científica UPC
Universitat: Universitat Politècnica de Catalunya
Càtedra /Departament: Universitat Politècnica de Catalunya. Departament d'Enginyeria Química
Matèries: Àrees temàtiques de la UPC::Enginyeria química::Química orgànica::Bioquímica
Biochemistry
Oxidases
Lactates
Bioquímica
Oxidases
Àcids carboxílics
Data: jun-2010
Tipus de document: Master thesis
Resum: Mutations N212S and S178N of Lactate Oxidase (LOX) from Aeorcoccus viridanswere prepared by site directed mutagenesis and confirmed by sequencing. Once these two mutations were created, the mutated protein was expressed, purified and characterized along with the Wild Type (WT). A protocol was established for purifying the Double Mutant (DM) and the WT, consisting ofan ammonium sulfide precipitation before two subsequent FPLC steps,the former one with a hydrophobic interaction column (HIC), and a proper MonoQ ion exchange column. After obtaining an adequate level of purification confirmed by an electrophoresis gel, a basic biochemical characterization was performed. The specific activity, Vmax and Km values of the WT and the Double Mutant were calculated with SIGMAPLOT 9.0 software. Comparisons between each other showed a considerable loss of activity by the double mutant. After comparing the biochemicalparameters between WT and DM, the preliminary conclusion is that all though the mutantstill shows some activity, it might be failing to accomplishat least part ofthe two-stepreactionthat the WT does, due to a steric change in the substrate entrance.
URI: http://hdl.handle.net/2099.1/10725
Condicions d'accés: Restricted access - author's decision
Apareix a les col·leccions:Màster en Enginyeria Biotecnològica
Comparteix:



SFX Query

Tots els drets reservats. Aquesta obra està protegida pels drets de propietat intel·lectual i industrial corresponents. Sense perjudici de les exempcions legals existents, queda prohibida la seva reproducció, distribució, comunicació pública o transformació sense l'autorització del titular dels drets.

Per a qualsevol ús que se'n vulgui fer no previst a la llei, dirigiu-vos a: sepi.bupc@upc.edu

 

Valid XHTML 1.0! Programari DSpace Copyright © 2002-2004 MIT and Hewlett-Packard Comentaris
Universitat Politècnica de Catalunya. Servei de Biblioteques, Publicacions i Arxius