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Diseño de una planta de producción de interferón alfa recombinante pegilado

Thu, 14 Mar 2013 00:00:00 GMT

Title: Diseño de una planta de producción de interferón alfa recombinante pegilado Authors: Salera Gramajo, Patricio Abstract: Se ha estudiado el interferón α, sus aplicaciones como fármaco en la lucha contra enfermedades como la hepatitis B y C, o la leucemia mieloide crónica, y su pegilación para la mejora de sus propiedades farmacocinéticas y farmacodiámicas. Se ha estimado las necesidades de fármaco para el mercado español y se ha diseñado una planta de producción (para satisfacer esa demanda) de peginterferón α-2a recombinante, usando, para su producción, Escherichia coli cultivada en biorreactores de alta densidad celular, y empleando un proceso de separación y purificación basado en el descrito por K. R. Babu y colaboradores (2000), pero en continuo. Además se ha diseñado el proceso de pegilación, también en continuo, junto con sus etapas de purificación basándose en los experimentos de P. Bailon (2001). Posteriormente se ha realizado un estudio económico, mediante el cual se ha demostrado la viabilidad del proceso diseñado.

Diseño de una planta de producción de hormona de crecimiento humano recombinante

Tue, 12 Mar 2013 00:00:00 GMT

Title: Diseño de una planta de producción de hormona de crecimiento humano recombinante Authors: Toledo González, Rafael Abstract: La hormona de crecimiento humano es uno de los primeros fármacos producidos de forma recombinante. El interés por la fabricación de este fármaco renace debido a la caducidad de las patentes que protegen a este producto. Es por tanto una gran oportunidad de negocio hacerse un hueco en el mercado de la producción de el principio activo de forma que se pueda comercializar como principio activo para genéricos. En este trabajo se muestra el proceso para la producción recombinante del principio activo y la posterior purificación, se realiza el diseño de los equipos y se calcula de forma estimada el coste de producción demostrando la viabilidad económica del proceso. Además también se aporta una posible solución cualitativa para el tratamiento de los residuos generados en la planta conforme con la normativa vigente tanto del Gobierno de España como de la Generalitat de Catalunya.

Biopolyester (PHB) obtaining by fermentation of Ralstonia eutropha

Mon, 25 Feb 2013 00:00:00 GMT

Title: Biopolyester (PHB) obtaining by fermentation of Ralstonia eutropha Authors: Soldado López, Carles Abstract: Nowadays, the dependence that our society has to non-biodegradable plastics derived from petroleum has created the necessity to develop an economically viable alternative. Biopolymers seem to be an attractive alternative to common plastics. Among all them, Polyhydroxyalkanoates (PHA) represent one of the most studied and important source of biopolymers. These biopolymers are produced naturally by various microorganism that use different nutrient sources to conduct the production. Many studies are focusing their efforts in the utilization of alternative substrates to reduce the final cost of the whole process. Besides, the utilization of transgenic organisms (obtained through genetic engineering techniques) for biopolymers production seems to be the path to follow for a higher PHA production and to diminish the cost of the whole biosynthesis. Bearing in mind all this information, in the present thesis, a work to study all the different aspects that involve the obtaining of PHB through fermentation in Ralstonia eutropha was carried out. Hence, the thesis pretends to evaluate experimentally the obtaining, isolation and characterization of PHB in Ralstonia eutropha using different configurations and systems. All these experimental stages were carried out in Terrassa and Barcelona (UPC). Besides, this study includes a theoretical part where all the aspects referred to PHB are analyzed and supports the experimental work carried out. During the experimental part, three different fermentations with Ralstonia eutropha were conducted. The main aim of these fermentations was to see the effect of time and glucose dosage in a fermentative process considering an initial medium –according to literature- as standard. In all these processes, an extraction method with chloroform was used to isolate the final biopolymer. Afterward, a characterization of the product obtained by means of FTIR, NMR and GPC analysis was carried out. All these results are presented in the corresponding section. Besides, in the thesis, an economic study is included in the appendix section. This study comprises the economic cost that is required to develop the PHB process described in the experimental part. Thus, the economic cost, the income and the budget of all the different aspects of the process are considered.

Efecto del tratamiento térmico sobre diferentes parámetros de calidad de la patata (Solanum tuberosum): textura y almidón

Fri, 08 Feb 2013 00:00:00 GMT

Title: Efecto del tratamiento térmico sobre diferentes parámetros de calidad de la patata (Solanum tuberosum): textura y almidón Authors: Muñoz Martin, Sergi Abstract: La patata (Solanum tuberosum) tiene una elevada biodiversidad y un alto contenido de almidón que le permite ocupar el cuarto lugar mundial en importancia como alimento. Su forma de consumo más habitual es cocida, hervida o frita, pero la composición inicial de la patata, el tratamiento realizado y la intensidad del mismo pueden tener diferente repercusión sobre la calidad final de la patata, y por lo tanto, sobre su aceptación a la hora del consumo. El objetivo del presente trabajo es estudiar el efecto de diferentes tratamientos térmicos severos (esterilización, fritura, hervido y microondas,) y pre-tratamientos (congelación a -20°C, escaldado con posterior congelación a -20°C y escaldado) sobre algunos parámetros de calidad en tres variedades de patata de consumo: Ágata, Agria y Carrera. Los cambios producidos en color, materia seca, textura, contenido de almidón total y almidón resistente, así como sus posibles interacciones serán evaluados. Los resultados confirman que los tratamientos térmicos severos afectan en mayor medida a los parámetros físicos y físico-químicos que los pre-tratamientos, obteniéndose pérdidas significativas de color, luminosidad y textura en las tres variedades, siendo en general, la esterilización y el hervido los tratamientos más drásticos, a excepción de la textura en la variedad Carrera, donde el que más efecto produce es el microondas. En las tres variedades se produce un aumento del contenido de materia seca, en particular con la fritura, debido a la absorción de aceite. Los contenidos de almidón total y almidón resistente disminuyeron en todos los tratamientos, siendo esta disminución del orden del (7% y 70%) en los tratamientos severos y del (4% y 17%) en los pre-tratamientos. Se ha obtenido una correlación positiva estadísticamente significativa (p<0,05) entre textura y almidón resistente para todos los tratamientos.

Estudi de la degradació de paracetamol mitjançant el procés foto-Fenton 2

Fri, 08 Feb 2013 00:00:00 GMT

Title: Estudi de la degradació de paracetamol mitjançant el procés foto-Fenton 2 Authors: Ortega Álvarez, Esther Abstract: Aquest treball pretén col·laborar en la cerca de solucions de millora de la qualitat de l’aigua que ha estat contaminada amb productes farmacèutics. Aquests productes pertanyen al grup conegut com contaminants emergents, la majoria dels quals presenten problemes de toxicitat i són difícils d’eliminar mitjançant tractaments convencionals. L’estudi es centra en l’aplicació del procés foto- Fenton sobre el fàrmac paracetamol, àmpliament utilitzat com analgèsic i que per tant, es troba habitualment present en aigües residuals. Per tal de poder determinar de forma qualitativa, i en alguns casos quantitativa, l’evolució del contaminant i els seus intermedis en funció del temps de reacció, ha calgut desenvolupar i testejar tant els mètodes d’anàlisi com el procés de pressa i conservació de mostra per avaluar diferents condicions experimentals. També s’ha fet un esforç per sistematitzar el treball experimental realitzat desenvolupant procediments normalitzats de treball que garanteixin, no tan sols l’ús correcte dels equips i la reproductibilitat de les mesures, sinó també, el desenvolupament de l’estudi sota criteris amigables amb el medi ambient i sostenibles. A partir del disseny dels experiments, s’han estudiat les condicions més favorables, a escala de planta pilot, per a obtenir la reducció del contaminant en les condicions més eficients possibles. S’han fet una sèrie d’experiments per tal de poder avaluar la degradació del paracetamol i del seus intermedis (per HPLC) en les diferents condicions experimentals: concentracions de peròxid d’hidrogen i ferro afegits, i presència o no de radiació de llum. Paral·lelament s’ha determinat la degradació de carboni orgànic total de totes les mostres i s’ha fet l’estudi de l’efecte de la llum i la seva eficiència quàntica aparent en la degradació de TOC (per avaluar la intensitat de fotons presents a la reacció s’ha realitzat una actinometria). El seguiment del consum de peròxid d’hidrogen (reactiu del procés), en els diferents experiments realitzats, també ha aportat informació sobre els mecanismes de reacció i la cinètica de degradació del contaminant i el seus intermedis. Després de verificar que el Paracetamol no és biodegradable en el rang de treball d’aquest estudi, s’han avaluat mitjançant la DBO5 diferents mostres de paracetamol que han estat tractades amb processos d’oxidació avançada. L’objectiu és analitzar si l’aplicació d’aquests processos incrementa la biodegradabilitat de l’aigua tractada. Del tractament de les dades experimentals s’han pogut extreure diverses conclusions, de entre les que destaquen: - L’eliminació del paracetamol un cop sotmès als processos d’oxidació avançada estudiats en els rangs en què s’ha realitzat l’estudi. - En funció de les condicions experimentals, s’arriben a diferents graus de mineralització dels intermedis. En cap cas s’aconsegueix incrementar la biodegradabilitat de les mostres tot i haver eliminat el contaminant (paracetamol).

Purificació cromatogràfica del factor antihemofílic A

Fri, 08 Feb 2013 00:00:00 GMT

Title: Purificació cromatogràfica del factor antihemofílic A Authors: Berney Busquets, Neus Abstract: La producció del factor antihemofílic A (FAHA) utilitza una columna cromatogràfica d’afinitat per tal de purificar el complex del FAHA (FAHA:FvW), la qual està alimentada pel crioprecipitat del plasma humà, pre-tractat amb S/D (Solvent/Detergent) parcialment purificat. Per optimitzar el procés, en aquest estudi es vol reduir el volum de columna al màxim, injectant el mateix material de partida a la columna. Per tal d’aconseguir els mateixos rendiments i la mateixa quantitat, o menys, d’impureses, es modifica el material de partida, ajustant-lo amb 100 mM de NaCl, i variant el seu pH. Per aconseguir el pH més idoni es proven diversos pH: 6,3; 6,5; 6,7 i 6,8. Les columnes utilitzades per portar a terme les proves són de 50ml i després passen a ser de 150ml, per fer més pràctic el procés . Aquestes columnes estan empaquetades amb una resina d’un glicosaminoglicà porcí. Es treballa amb un Äkta prime plus, unit a la columna per tal de monitoritzar les DO, conductivitats i pH’s. Després d’eluir el complex del FAHA es realitza una concentració amb un ultrafiltre per deixar l’eluït a 3,5 UA. Les experiències realitzades mostren que el pH òptim de treball per aconseguir un millor rendiment de FAHA es troba dins l’interval de pH 6,5-6,7. Amb aquest interval de pH també es trobarien les millors condicions per minimitzar la presència de més proteïnes acompanyants com són el fibrinogen, la fibronectina, l’antitrombina, el FII, l’hemopexina, l’haptoglobulina, la glicoproteïna alfa 1 àcida, l’antitripsina alfa 1, l’albúmina i la immunoglobulina G.

Producción de transtirretina recombinante en Escherichia coli a escala biorreactor

Thu, 07 Feb 2013 00:00:00 GMT

Title: Producción de transtirretina recombinante en Escherichia coli a escala biorreactor Authors: Bassetto Kwiatkowski, Isadora Abstract: La transtirretina (TTR) es una proteína plasmática, involucrada en el transporte de la tiroxina y del retinol. Su forma wild-type y sus diferentes mutantes están asociados a diferentes amiloidosis, siendo la mutación Y78F la más amiloidogénica. El presente trabajo tenía como principal objetivo la producción y purificación de lotes de hTTR Y78F y la identificación de posibles modificaciones posttraduccionales en el residuo de cisteína. La expresión de la proteína se dio en E. coli a escala biorreactor y las técnicas básicas de purificación incluyeron disrupción celular, precipitación fraccionada de proteínas y cromatografías de intercambio iónico y de gel filtración. Para la identificación de las modificaciones post-traduccionales se usó la técnica de MALDI-TOF. Durante este trabajo, se pudo confirmar que la producción de TTR en biorreactor, incluso sin haber estado optimizado, es mucho más ventajosa que en erlenmeyer, tanto en términos de cantidad de proteína recuperada como en términos de productividad volumétrica. También se observó que, para las condiciones experimentadas, un tiempo de inducción de aproximadamente 4 horas es lo más indicado. Con relación a las modificaciones post-traduccionales se observó que están presentes a lo largo de toda la inducción, que su perfil temporal no varía en un mismo experimento y que son removibles con el agente reductor DTT.

Inhibición de microorganismos en simulante de miel mediante ultrasonidos.

Wed, 06 Feb 2013 00:00:00 GMT

Title: Inhibición de microorganismos en simulante de miel mediante ultrasonidos. Authors: Borrero Moreno, José Manuel Abstract: La miel es un alimento constituido principalmente por una disolución muy concentrada de azúcares (60-80 %), teniendo una actividad de agua inferior al 0.6. Esto hace que el producto sea estable, además de que el crecimiento de microorganismos no exista sí la humedad es inferior al 18%. También cuenta con moléculas como: H2O2, ácidos orgánicos, compuestos fenólicos. Además de la acidez, que ejercen un efecto inhibitorio de microorganismos. [1,2] Consta, que la miel tiene un efecto inhibidor de unas 60 especies de bacterias, incluyendo aerobios y anaerobios gran positivo y negativo. [3] Aún así, al ser una gran fuente de carbono, si la miel se humedece, existe una microflora que puede crecer si el alimento no se ha pasteurizado. Los microorganismos que pueden encontrarse en la miel son principalmente levaduras y bacterias. Siendo las principales fuentes de contaminación: el intestino de la abeja, el polvo, el aire y el polen, que son muy difíciles de controlar. También existen unas fuentes secundarias de contaminación, que es referente al proceso industrial, contaminación en equipos, personal, edificios… [1,4] Recientemente la técnica de ultrasonidos combinada con un tratamiento de calor “termosonicación” se ha aplicado en la industria para la inactivación de las bacterias y hongos en el procesamiento de alimentos, sin tener que someter el alimento a temperaturas muy altas, para así no perder las cualidades organolépticas del alimento. [5, 6] Los primeros estudios que se han realizado sobre la miel, en nuestros laboratorios, son los de la tesis [7] de Dania Kabbani “Ultrasound-assisted liquefaction of honey”. Entre otros aspectos, estudia el efecto de los tratamientos de ultrasonidos y calor sobre la miel de romero para la inhibición en el alimento. Complementando la tesis, se plantea hacer las pruebas en simulante de miel. Por lo que, en éste proyecto, se usará un simulante de miel que tendrá la misma composición de azúcares que la miel de romero, sin ninguna molécula antibacteriana propia de la miel. Para así, ver los efectos de un tratamiento de termosonicación, sin que interfiera otro agente inhibitorio. Los resultados indican que: Si existe una inhibición de microorganismos en un simulante de miel después de un tratamiento de termosonicación. Así, se puede descartar, que la inactivación de microorganismos en miel tratada sea exclusivamente por moléculas intrínsecas inhibitorias.

Influencia de las condiciones aerobias y microaerófilas en la cinética de crecimiento de Saccharomyces cerevisiae, y en la diferenciación de las subpoblaciones quiescentes y no quiescentes

Wed, 06 Feb 2013 00:00:00 GMT

Title: Influencia de las condiciones aerobias y microaerófilas en la cinética de crecimiento de Saccharomyces cerevisiae, y en la diferenciación de las subpoblaciones quiescentes y no quiescentes Authors: Carta Torres, Akatibu Abstract: La gran mayoría de las células, desde procariotas hasta organismos vertebrados, pasan la mayor parte de su vida en quiescencia, un estado definido por la ausencia temporal y reversible de la proliferación. La levadura Saccharomyces cerevisiae, representa un modelo ideal para el estudio de la quiescencia, ya que es el organismo eucariota más conocido y manejable en todos los niveles del análisis experimental. Además, se ha demostrado que las levaduras y células de mamífero comparten muchas características cuando están en estado quiescente. En la actualidad, el conocimiento que existe sobre la quiescencia, es limitado, los mecanismos de entrada, mantenimiento y salida de este estado son aun desconocidos; esto debido en parte a la dificultad de separar las células quiescentes de las no quiescentes. En el laboratorio, los cultivos de Saccharomyces cerevisiae en estado estacionario presentan una población heterogénea, conformada por células quiescentes y no quiescentes. El objetivo de esta investigación es evaluar la influencia de las condiciones de crecimiento aerobias y microaerófilas en la cinética de crecimiento y en la diferenciación en población quiescente y no quiescente. Primero se hicieron ensayos para medir la cinética de crecimiento de la población total en fase estacionaria tanto para crecimiento en condiciones aerobias como microaerófilas; luego se hizo la separación por centrifugación en gradiente de densidad de las subpoblaciones quiescentes y no quiescentes; y se determinó la cinética de estas poblaciones por separado. La concentración de oxígeno inicial condiciona la cinética de crecimiento, sobre todo la duración de la fase lag. En condiciones microaerófilas, el tiempo requerido en fase lag es prácticamente el doble que en condiciones aerobias de crecimiento. Los resultados cinéticos de esta investigación permitieron confirmar resultados de estudios previos sobre la población en fase estacionaria de Saccharomyces cerevisiae, basados en citometría de flujo. En condiciones aerobias, se identificó la existencia de dos poblaciones distintas en la fase estacionaria (quiescente y no quiescente), mientras que en condiciones microaerófilas los resultados indican que no se lleva a cabo esta diferenciación.

Rheological behaviour of adhesives derived from polyurethanes

Wed, 30 Jan 2013 00:00:00 GMT

Title: Rheological behaviour of adhesives derived from polyurethanes Authors: Maldonado Lara, Lídia Abstract: The necessity of measurement and quality control of key parameters in industry is significantly important. Therefore, techniques not requiring sample preparation are gaining market shares, since they offer reduction in costs and decrease the amount of time needed for analysis. By the use of rotational viscometers it is possible to control viscosity parameters relevant for optimised process control reducing analysis time significantly, and furthermore ensuring the repeatability and reproducibility of the results obtained. This study has been proposed by a company, which manufactures adhesives. The aim of the company was to improve their quality control processes for measuring viscosity. With that, the company pretends to save time within the analyses, therefore save time in production processes, triggering into a reduction of the cost of the global process. To this end was necessary to acquire knowledge of adhesives; hence, different analyses have been done to know their chemical, thermal and also mechanical and physical properties. In addition to it, for this thesis it has been necessary to be able to quantify the rheological phenomena occurring in those complex flows that take part in adhesives. So, knowledge on rheological behaviour was needed for setting the right product analyses, such as temperature and flow rate. The majority of the analyses have been done in the company that has proposed the thesis; and the rest took place in Barcelona, in the Polytechnic University of Catalunya. Moreover, this study includes a theoretical part where some aspects referred to adhesives are explained, supporting the experimental work carried out.

Cultiu de bacteri anaerobi per la producció d'electricitat i tractaments d'aigües residuals

Tue, 29 Jan 2013 00:00:00 GMT

Title: Cultiu de bacteri anaerobi per la producció d'electricitat i tractaments d'aigües residuals Authors: Garcia Ruiz, Albert Abstract: Els temps que vivim ens fan preveure un canvi energètic a mig termini, els combustibles fòssils a més de ser contaminants s’esgotaran tard o d’hora, hauríem de tenir una alternativa, una alternativa neta i potent. Neta per mantenir el nostre medi, neta per tenir una civilització sostenible i potent per alimentar els nostres vehicles, potent per escalfar-nos a l’hivern i potent per poder il·luminar les grans ciutats a la nit. Cada vegada fem més ús d’aparells electrònics i la demanda d’energia elèctrica cada dia és més alta. Per una altre banda, la població mundial cada vegada és més nombrosa i els recursos hídrics són cada vegada més escassos, també el cost de manteniment de les plantes de tractament aigües residuals és considerablement alt. Existeixen moltes possibilitats per reduir el cost de l’energia utilitzada en el procés de tractament d’aigües residuals. Per tant es natural considerar la importància de la instrumentació de mesures d’eficiència energètica a les plantes de tractament d’aigües residuals, a vegades aquests procés moltes vegades representa del 25 al 50 % el pressupost operatiu d’una planta. Alguns processos consumeixen més energia que d’altres i hauran de rebre més atenció. Per exemple a una planta de tractament de fangs activats, la fase biològica representa del 30 al 80 % dels costos d’energia de la planta. Per aquests motius ens hem de plantejar d’una vegada per totes crear o convertir la nostra societat en una societat molt més sostenible, molt més neta, per poder deixar un món habitable a els nostres fills. La responsabilitat és nostra i és ara el moment.

Valorización de co-productos biotecnológicos

Fri, 25 Jan 2013 00:00:00 GMT

Title: Valorización de co-productos biotecnológicos Authors: Nieto Rayo, Maite Abstract: La disminución de las reservas de petróleo y los diferentes problemas ambientales generados por los combustibles fósiles, entre otras causas, ha generado la búsqueda de nuevas fuentes de energía, entre las que se encuentra el biodiesel. El biodiesel, al que también se le conoce con las siglas FAME (ésteres metílicos de ácidos grasos), se produce a través de una reacción de transesterificación, en la cual un aceite o una grasa reacciona con un alcohol de cadena corta (normalmente metanol o etanol) para producir los respectivos ésteres y el glicerol como subproducto de la reacción. Para hacer posible ésta reacción se añade un catalizador. Actualmente, el biodiesel se produce a partir de diversas materias primas como soja, girasol, palma y jatropha, entre otras, las cuales son también utilizadas industrialmente para la extracción y comercialización de aceites comestibles, representando una barrera importante para la producción de este combustible. Es por esta razón que las investigaciones en el campo del biodiesel van dirigidas a la búsqueda de nuevas materias primas que produzcan un combustible eficiente sin afectar la alimentación, y que además sea económicamente viable. Una alternativa muy estudiada son los aceites de cocina usados en frituras. Éstos han demostrado ser una fuente económica para la producción de biodiesel debido a la alta disponibilidad, bajo costo y permitiendo además el reciclaje y reutilización como forma de energía renovable, ayudando así a disminuir el poder contaminante de estos residuos al no ser vertidos en fregaderos. Además de los aceites de fritura, se pueden emplear otras fuentes de material lipídico como grasas animales provenientes de industrias alimentarias u otras fuentes, o materia prima de muy baja calidad permitiendo revalorizar estos subproductos. Existe una amplia variedad de métodos empleados en la obtención de biodiesel en función del origen de la materia prima y sus características. La técnica más empleada es la transesterificación alcalina en la cual el catalizador utilizado es el KOH o el NaOH. Los catalizadores que pueden ser empleados para la reacción de transesterificación son muy diversos, y se pueden clasificar en catalizadores homogéneos y heterogéneos. Los catalizadores homogéneos son los más utilizados a nivel industrial y entre ellos se encuentran los catalizadores ácidos y alcalinos. Actualmente se están estudiando una gran variedad de catalizadores heterogéneos para mejorar los rendimientos de las reacciones cuando se emplean materias primas de baja calidad, como las resinas de intercambio o los catalizadores enzimáticos. El biodiesel es considerado como el mejor sustituto del diesel y puede ser utilizado puro o en mezclas biodiesel/diesel, presentando ventajas ambientales, económicas, y técnicas. Entre las normas más utilizadas que rigen la calidad del biodiesel se encuentran la EN 14214 (Norma europea) y la ASTM D6751 (Biodiesel Standard) donde se establecen valores límite permitidos para cada parámetro fisicoquímico, que predicen la eficiencia del combustible en el motor. Nuestro trabajo consiste en elaborar biodiesel a partir de co-productos biotecnológicos de origen animal provenientes de la industria farmacéutica. En primer lugar se describe el proceso de extracción realizado para obtener el material lipídico contenido en las muestras. Seguidamente se detalla la etapa de análisis, en las que se estudian las diferentes grasas para determinar algunos de los parámetros más importantes que influyen en la reacción de transesterificación como el contenido de agua en la muestra, el índice de acidez, el perfil de ácidos grasos de las muestras, etc. Se ha realizado el estudio de la reacción de transesterificación. Las grasas que contenían menor cantidad de ácidos grasos libres se han transesterificado utilizando catalizadores alcalinos obteniendo rendimientos de aproximadamente el 80%. En las grasas con un alto contenido en ácidos grasos libres ha sido necesario realizar un pretratamiento con ácido sulfúrico (permitiendo esterificar los ácidos grasos libres), seguida de la transesterificación alcalina tradicional. Además se ha realizado un estudio exploratorio con catalizadores enzimáticos, consiguiendo que la reacción se llevara a cabo con una enzima lipasa. Finalmente se ha realizado el estudio económico del proceso completo con las grasas empleadas.

La Calidad de los Datos Personales en el Ámbito Médico-Sanitario

Sun, 03 Jun 2012 10:47:05 GMT

Title: La Calidad de los Datos Personales en el Ámbito Médico-Sanitario Authors: Kress Sevilla, Alejandro Abstract: Este trabajo es un análisis del Estado del Arte sobre la protección de los datos de salud, incluido el sector biotecnológico. Esta materia tiene una creciente importancia debido a las normas aprobadas en España y la UE especialmente. Han surgido numerosos conflictos al respecto, también en el entorno médico-sanitario. El individuo como paciente empieza a asumir un papel más activo en la mejora de su salud, y ello incluye las fases de desarrollo de los ensayos clínicos. El paciente pasa a ser un sujeto activo de la investigación y se convierte en protagonista y motor de la Innovación. Así un modelo ideal de calidad de datos aportará una ventaja competitiva a ciertos modelos de negocio. Al mismo tiempo unas normas de buen gobierno corporativo traerán beneficios colaterales que contribuirán al éxito del modelo de negocio.

A computational study of the molecular determinants of the bacterial resistance to Quinolones

Thu, 17 Nov 2011 12:38:03 GMT

Title: A computational study of the molecular determinants of the bacterial resistance to Quinolones Authors: Serverin Lupala, Cecylia Abstract: Quinolones are widely studied antibacterial agents that act by forming a ternary complex with DNA and either one of the two essential type II bacterial topoisomerases: DNA gyrase and DNA topoisomerase IV. Inhibition of DNA replication is the resulting consequence. One of the unresolved issues concerning type II topoisomerases is their mode of interaction with quinolones. The aim of this research was to study the quinolones binding mechanism and resistance. For this purpose, two crystallographic structures (PDB codes 3k9f and 2xkk) of DNA-DNA topoisomerase IV complexed with a quinolone (levofloxacin and moxifloxacin respectively), were used. Mutant complexes were modeled to reflect known single mutations, S79A, D83Y, K137N and the double mutation S79A+D83Y. These mutations are known to confer resistance to quinolones. Molecular docking calculations of 15 quinolones (including ciprofloxacin, gatifloxacin, gemifloxacin, clinafloxacin, moxifloxacin, sitafloxacin, ofloxacin, levofloxacin, prulifloxacin, garenoxacin, grepafloxacin, trovafloxacin, sparfloxacin, temafloxacin and tosufloxacin) were performed using the crystal structures and modeled complexes of mutants. Furthermore, to get insight into the binding process, molecular docking calculations were also performed on DNA and protein separately. From the results of the calculations, the binding affinities of quinolones were found to be higher in wild type complexes structures than in modeled mutant complexes, protein or DNA structures. These results are similar to published experimental work that showed quinolones prefer binding to the DNA-protein complex than to DNA or protein. From the docking results we were able to explain interactions between quinolones and key protein residues and explain how mutations in these residues will result in resistance. The residues involved in chromosomal mutations are interacting with the drug moieties (carboxylate and ketone) that are essential for binding and quinolones activity and thus can not be substituted. We have suggested several structural substitutions for new and improved quinolones. Finally, by comparing the different crystal, docked and modeled structures, docking scores and other published studies on quinolone binding model, we were able to provide an insight into the complex formation. We suggest that the binding of DNA to the enzyme generates a structural perturbation that originates the binding site for the quinolones. In turn the quinolones stabilize the DNA-enzyme complex, with a significant increase in the likehood of a double stranded DNA break that is the presumed cytotoxic effect.

Production, purification and biochemical characterization of lactate oxidase wild type and double mutant

Thu, 30 Dec 2010 17:42:27 GMT

Title: Production, purification and biochemical characterization of lactate oxidase wild type and double mutant Authors: García Grillasca, Gustavo Abstract: Mutations N212S and S178N of Lactate Oxidase (LOX) from Aeorcoccus viridanswere prepared by site directed mutagenesis and confirmed by sequencing. Once these two mutations were created, the mutated protein was expressed, purified and characterized along with the Wild Type (WT). A protocol was established for purifying the Double Mutant (DM) and the WT, consisting ofan ammonium sulfide precipitation before two subsequent FPLC steps,the former one with a hydrophobic interaction column (HIC), and a proper MonoQ ion exchange column. After obtaining an adequate level of purification confirmed by an electrophoresis gel, a basic biochemical characterization was performed. The specific activity, Vmax and Km values of the WT and the Double Mutant were calculated with SIGMAPLOT 9.0 software. Comparisons between each other showed a considerable loss of activity by the double mutant. After comparing the biochemicalparameters between WT and DM, the preliminary conclusion is that all though the mutantstill shows some activity, it might be failing to accomplishat least part ofthe two-stepreactionthat the WT does, due to a steric change in the substrate entrance.